三尖杉为三尖杉科三尖杉属植物,别名有头形杉、三尖松、山榧树、明油果等。属于裸子植物也是古老的孑遗植物,属于常绿乔木。其木材黄褐色,纹理细致,材质坚实,韧性强,有弹性,比重0.59~0.77。可供建筑、桥梁、舟车、农具、家具及器具等用材。成熟种子可用于鲜食,枝、叶、种子是止咳、润肺、消积、驱虫杀虫的良药。叶、枝、种子、根可提取多种植物碱,对治疗各种白血病及淋巴肉瘤、肺癌等有一定的疗效;假种皮含油率为38%,种仁含油率55%~70%,是优良工业油原料,用于油漆、肥皂、蜡与硬化油等。三尖杉果实酱红色,树形美观,具有观赏价值,此外三尖杉释放的气体有净化空气和杀菌的作用,能有效预防老年心血管病。
美国农业部北区研究室是最早开展三尖杉属植物化学研究的机构组织,1963年Paudler等首次从三尖杉和日本粗榧(植物中分离得到三尖杉酯碱及三尖杉碱。1969年以后Powell等才确定了它们的结构,并且又从中分离得到多种生物碱,发现这些酯碱类化合物具有抑制小鼠白血病细胞生长作用,从而引起人们对其生物碱类成分的广泛研究和重视。中国对三尖杉植物研究工作开启于20世纪70年代初,1972年中国全国肿瘤会议中把它列为重点研究抗癌药用植物,并成立三尖杉研究协作组,开展了分布在中国境内的三尖杉植物生物碱的资源普查,各种三尖杉酯碱的提取分离、结构鉴定和抑癌作用的研究工作。上世纪70年代末,已经分离鉴定了20多种生物碱,其中的4种酯碱最为重要而且活性显著,即三尖杉酯碱(harringtonine,HT)、高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)、异三尖杉酯碱(isoharringtonine,IHT)和脱氧三尖杉酯碱(deoxyharringtonine,DHT)。1976年中国医学科学院药物研究所分离出的三尖杉酯碱对动物移植性肿瘤有一定的抑制作用,临床初步证明海南粗榧总生物碱对急性及慢性粒细胞白血病和恶性淋巴瘤等有一定的疗效;其酯碱对小鼠白血病及克癌、肉瘤有疗效。1978年由中国生产的高三尖杉酯碱注射液面市,用于急性粒细胞性白血病、急性单核细胞性白血病及恶性淋巴瘤。20世纪80年代初,马彦卿等对安徽省太平县产三尖杉与江苏省宜兴县产粗榧的样品进行了三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱含量测定,发现不同部位和不同采集季节的酯碱含量不同,指导我们在最佳时节用最佳部位可以获得最大量的酯碱,有效保护资源。临床应用中HT和HHT配合其它中药治疗各种类型白血病均有较好疗效,通过对三尖杉酯碱衍生物的合成及构效关系的研究,至今已设计合成了化合物90余个,但其药理活性均低于天然酯碱。由于HT和HHT目前只能从此属植物中分离,体外培养的此类植物细胞中此二种生物碱含量(尤其是HHT)相对原生植物含量明显低,目前此两生物碱的实际生产仍然是从植物中提取。野生的三尖杉资源远远满足不了市场需求,因此开展三尖杉种苗繁育工作势在必行。王硕明、周永玲、吕玉华等人先后对三尖杉进行种子和扦插繁育工作,取得重大进展。后来进入21世纪除了三尖杉外,易思荣等对三尖杉属的篦子三尖杉种子进行繁育并取得成功,通过采用低温处理种子减少其种子休眠,可应用于生产上;戚淑威等人通过用种子及扦插的方式对高山三尖杉进行繁育;周永华等人通过试验发现将移栽小苗的根部切去1/2~1/3,可以提高三尖杉苗木成活率及苗木的质量。焦月玲等人在对不同种源地种苗生长对比发现,来自不同产地的三尖杉,其种子、苗木形态与生长性状差异显著。试验观测到,来自东南部地区的三尖杉种源种子较长,苗高生长量较大,分枝稀少,而中西部地区的三尖杉种源种子较短,苗高生长量较小,分枝较多。李士坤、孙雪忠等在前人基础上通过种子及研究了不同种源、树龄、插穗类型、插穗处理和基质等多种因素对扦插影响,提高种苗成活率,为三尖杉产业的发展提供实践依据。
十年前英国发表过一个预测报告,当时全球急性白血病治疗药物总销售额将接近亿美元,年增长率16%。有报道显示,100~150千克三尖杉干枝叶只可提取3克双酯碱,其在国际市场上售价20万~30万美元/千克。全球白血病药物需求极大,药物价格高,目前中国有白血病患者约500万人,大多数都需要间歇药维持,按人均用(高)三尖杉酯碱注射液1000元/年,其市场容量将达到50~60亿元。三尖杉天然资源稀缺,抗肿瘤药物市场需求量又呈逐年上升趋势,造成市场供需关系严重失衡。随着(高)三尖杉酯碱临床研究的不断深入,新用途得到不断拓宽,除了其具有抗肿瘤、治疗白血病外,(高)三尖杉酯碱在预防后发性白内障、防治青光眼滤过术后的瘫痕、实体瘤化疗等多方面取得了良好的进展。因此该树种的市场发展潜力巨大,发展前景广阔。
三尖杉喜温暖湿润的气候和深厚肥沃的中性壤土,在林下光照强度较差的环境也能生长。其分布范围较广,对气候条件具有较强的适应性,生境较为复杂。分布的气候有典型的亚热带湿润季风气候,气候温暖湿润,以及半湿润的高原气候干湿季节交替较为明显,气温的日变化和年变化较大热量条件较差。土壤类型多山地黄壤、黄棕壤,部分海拔较低处也有黄红壤分布,土表的枯枝落叶凋落物较为丰富,酸碱度pH值4.5~6.5的土壤中都可以生长。海拔500~1300米坡度缓坡、斜坡、平坡坡向为阴坡及无坡向坡位中、下、谷、平地腐殖质层厚度、土壤厚度为中、厚土壤质地沙土、砂壤土、轻壤土。分布地的年均温10.6℃~18.1℃,可忍耐零下12.4℃的低温。
三尖杉种子是生理休眠和器质休眠兼具的种子,种子成熟8~10月,种子需要1年以上的休眠期后发芽,甚至有些休眠的时间更长,并且出芽不齐,每年3月中旬至4月下旬播种较为适宜,播后30~60天出土,出土后需要10~18天长叶。5~10月份是出苗旺盛期,三尖杉主根明显深扎,1年生苗主根长20厘米以上,侧根和吸收根少,幼林依赖阴湿环境且生长缓慢。小枝对生,1~2年小枝茎皮深绿色至浅褐色,直径0.2~0.5厘米,无毛。叶螺旋状排成两列,叶片披针形。三尖杉2~3年后可以进行造林。
三尖杉属的系统位置历经归属于红豆杉科、罗汉松科和自己独立成属的三种不同的意见;Neger认为三尖杉属的雌球花极为特殊,与红豆杉科其他属存在显著区别,将其从红豆杉科中分出建立了三尖杉科;现如今,许多学者通常认为三尖杉属是三尖杉科的唯一属。三尖杉属于三尖杉科三尖杉属植物。三尖杉在不同的地区有不同叫法:头形杉、三尖松、藏杉、狗尾松、桃松、铁文松、水油松、山榧树、稠杉树、明油果、水竹、龙泉、杜松、涎树、乌籽、明杉、杉柏等,为中国特有树种。三尖杉属植物共有9种,中国产其中7种3变种分别为:篦子三尖杉、西双版纳粗榧、贡山三尖杉、三尖杉、台湾三尖杉、海南粗榧、粗榧,其中后4种属于中国特产;云南产除台湾三尖杉外的6种;3变种分别为高山三尖杉、绿背三尖杉、宽叶粗榧。
三尖杉除了是中国特有树种外,还属于珍贵古老孑遗植物。分布于云南、四川、贵州、浙江、福建、安徽南部、江西、湖北、湖南、河南南部、陕西南部、甘肃南部、广西及广东等省区。在东部各省生于海拔200~1000米地带,在西南各省区分布较高,可达2700~3000米的山坡疏林或山涧潮湿地带、溪谷湿润而排水良好的山洼、山谷、溪边、阴坡等地,多见于阔叶树、针叶树混交林中。与三尖杉伴生的树种主要有钩拷、五角枫、青榨槭、厚皮香、红楠、水青冈、毛竹等。三尖杉在云南地区分布较广,主要是昆明、宜良、禄劝、寻甸、富源、昭通、镇雄、彝良、宣威、楚雄、峨山、大姚、文山、丘北、麻栗坡、景东、蒙自、石屏、广南、大理、云龙、祥云、洱源、剑川、鹤庆、丽江、宁蒗、维西、永德和凤庆等县(市),呈间断块状分布,通常零星生长于海拔2000~3300米的沟谷灌丛或杂木林中。
三尖杉的繁殖主要有播种、扦插、切根和组培等方法。下面主要对这四种方法分别进行介绍。
(1)种子采收及储藏。
三尖杉种子成熟期一般是在8月下旬至10月上旬,成熟的种子采回后集中堆放3天至7天或者盖上一层塑料布尽可能使果肉成熟软化;将果肉及果皮搓去,用水将种子冲洗干净、去除杂质及瘪种,将水沥干后摊放在通风阴凉干燥处,注意要经常翻动,待其阴干,然后装在透气性好的麻袋、塑编袋中悬挂备用。种子晾干后可以直接播种或者沙藏层积的办法催芽处理待第二年2~3月播种。
(2)种子处理
三尖杉种子具有休眠性且时间较长,及时解除三尖杉种子的休眠状态,提高发芽率,是三尖杉种子育苗成功的关键。
解除三尖杉种子休眠,可以采用层积催芽法。首先可以将种子用干净塑料袋包装后置于4℃~5℃的冰箱中低温冷藏15~30天。低温处理过后对细河沙(或江沙)和种子进行杀菌消毒。将细沙与多菌灵以1:7000~1:10000的比例充分拌匀,这个过程中加入适量水,用手握紧细沙后细沙不散开、挤不出水为宜;三尖杉种子在常温下用水浸泡一昼夜,之后用0.3%~0.5%的高锰酸钾溶液或1%~2%的硫酸铜溶液浸种2小时,再用清水漂净残存的消毒溶剂后捞出待用。
基质细沙和种子都杀菌消毒后,按照种子与沙的比例是1:3将它们混合均匀,沙藏的地方事先选择在背风、背阴、干燥、势高、排水良好处挖层积沟,沟深65~85厘米,宽60~80厘米,长度不定,并在层积沟四周挖好排水沟。挖好的沟内事先铺一层10厘米厚的配好的混匀的细沙,其上放入已混合好的种子,厚度到离沟沿10厘米为宜,其上再铺10厘米厚的细沙;如果处理的种子数量不多,种子与细沙混合后也可放入瓷花盆或木箱内层积催芽处理,同样先在花盆或木箱底部铺一层5~10厘米的细沙,再在细沙上铺一层处理过的种子,接着再铺一层3~5厘米的细沙,上面再铺一层处理后的种子,以此类推一层细沙一层种子,注意最后一层细沙的厚度要大于5厘米,并留足与沟沿5~8厘米的空间,有利于种子进行呼吸作用,防止种子腐烂;或者可以将混匀后的种子放到细孔纱网袋中扎好口,再放置于沟内、花盆或者木箱内,放好一层或者一袋纱网袋后要铺一层3~5厘米细沙,以此一层细沙一层袋的放好,最后一层细沙厚度也要大于5厘米,并留够空间。注意要使贮藏地保持湿润、低温、通风的良好环境。
三尖杉层积处理期间,每个月要对处理的种子进行2次水分含量的检查,适量喷水,保持沙子的湿度;每隔1个月要翻动一次,及时捡出霉烂种子,若发现有霉斑,要及早把细沙与种子一并倒出,将种子重新搓洗干净后与消毒过的细沙重新混匀后再进行储藏;同时也要注意鼠害。处理4个月后,三尖杉种子有较明显的胚形成;第八个月后有少量的种子开始发芽。此时,应及时捡出已发芽的种子播种到苗圃地中培育出苗。到第二年1~2月,三尖杉种子种胚已显著伸长并胀破种皮即可取种育苗。
(3)苗床准备。
三尖杉育苗地宜选择在地势平坦、土层深厚、肥沃、偏酸性沙性土壤且保水性好,并且具备灌溉设施和遮阳设施的地块,排水不畅地块不宜栽培。头年11月到第二年2月深翻土壤2~3次,充分暴晒,以减少土壤病害。施足底肥,底肥施入细碎腐熟厩肥或堆肥2000千克/亩,撒于畦面;施用适量辛硫磷、硫酸亚铁以及撒施五氯硝基苯和代森锰锌(3:1),以防治地下害虫和调节土壤酸碱度;结合整地深翻土壤将肥料与防虫药一并翻入土内,理畦时捡去碎石杂草与较大的土块,畦面平整,苗床或垄高20~25厘米,宽1~1.2米,间距25~30厘米,长度不限;四周开好排水沟、中沟浅、边沟深,做到雨停水不留。
(4)播种。
播种前2周用0.3%高锰酸钾或福尔马林溶液浇灌苗畦进行消毒,深度为20~30厘米为宜,浇后用塑料薄膜封好,7天后揭开,需要晾置5天后再播种。播种前先将苗床浇透水,再进行播种。播前种子用1%~2%的硫酸铜溶液消毒5分钟,之后用40℃温水加入50°白酒浸种30分钟,捞出后可用于播种。播种方法有点播、条播和撒播,一般较多采用点播和条播,而点播的出芽率及出苗的质量较高。点播株距5~8厘米,行距10~15厘米,沟深5厘米;条播株距3~5厘米,行距12~15厘米;播后覆盖上一层2~3厘米厚的腐殖土,稍加压实并一次性浇透水,后期要注意保持苗床的湿润;最后盖上1~2厘米厚的松针、稻草或者有条件的可以覆盖上一层防草布,起到保持土壤湿润,避免过旱或过涝,防止小苗干死或病变,以及过冬保暖的多重作用。
(5)苗期管理。
播种后1个月左右,幼苗大量出土,此时揭去松针或稻草,即刻搭建遮阳棚,适时喷水降温保湿,以利幼苗生长。幼苗经过2个月生长后,根据天气情况,撤除或加盖遮阳物,晴天10:00~16:00要遮阴,阴天除去遮阳物,增强光照,提高苗木的抗逆性。出苗到第二年均要遮阳。整个生长期间加强水分管理,适当喷水保湿,使湿度保持在50%~70%。雨季要及时排除积水。苗长得过密,到小苗3~4叶1心后,按照株距15厘米,行距20厘米进行疏苗移栽。保持田间苗床无杂草,除草要做到“除早、除少、除了”,结合中耕每次追施尿素5~30千克/亩、氯化钾0.5~1.0千克/亩,对水浇施或趁雨天撒施。还可在叶面喷施0.25%的尿素与磷酸二氢钾。选用3%啶虫脒乳油1500倍液、0.3%苦参碱水剂500倍液、1.8%阿维菌素乳油2500~3000倍液、43%联苯肼酯悬浮剂2000~3000倍液等轮换喷雾防治蜘蛛或蚜虫。出苗后每隔7~12天用1%波尔多液或者65%敌磺钠可溶粉剂800倍液喷雾苗木根部,连喷3次,预防猝倒病或立枯病发生。
(1)苗床准备。
为了有利于三尖杉插穗的生根,应选择地势平坦、土层深厚肥沃、浇灌排水方便,有机质含量较高的壤土酸性沙质土作床。先在插床底部铺上15~20厘米农家有机肥与土壤的混合物,再铺上一层3~5厘米厚的细河沙。在苗床上方搭建小拱棚,上方覆盖一层薄膜(小拱棚使用条形竹片搭建,拱顶距床面50厘米,每隔80厘米成弓状插一条竹片,上面覆盖塑料薄膜。)。按床面宽1.2米,高20~25厘米,步道0.3~0.5米宽。扦插前2~3天,用65%代森锌可湿性粉剂500倍液或者75%百菌清可湿性粉剂600倍液浇灌消毒。
(2)插穗准备。
取用树冠中、上部1~2年生带顶芽、粗壮且无病虫害枝条为宜,长度10~15厘米,最好是随剪随插。如果插穗要经过长距离或者长时间的运输保存,则尽量松散放置,不可挤压过紧,如果发现枝条有温度升高的现象,应及时洒水降温。
(3)插穗处理。
插穗长度控制在10~15厘米,保留穗条顶芽及顶部的3~5片叶,摘除其余叶片;在枝节处用枝剪剪成马蹄形斜口作为插条下口,每30~50支插穗为一捆,捆扎时使其根部对齐。将穗条基部3~5厘米浸入50%多菌灵可湿性粉剂800倍液中消毒30分钟,之后放入ABT1生根粉200毫克/千克溶液中浸泡,深度3~5厘米,浸泡10~16个小时,浸泡后取出枝条,稍晾干后进行扦插。
(4)扦插。
扦插时间4月到8月上旬,最宜在6月中旬,具体可根据扦插所在地而定;扦插2~3个月即可生根。扦插密度为5厘米×8厘米,深度3~5厘米;扦插前先用圆形筷子按株行距定点以45°斜插孔,然后将插穗插入孔中,之后覆盖1~2厘米基质;按照45°斜插可以使斜口和基质的充分接触,有利于生根。扦插后立即喷透一次水,再覆50厘米高的塑料小拱棚,拱棚上再盖一层30%的遮阳网,避免阳光直接照射。
(5)扦插后管理。
扦插后的管理主要是每天进行喷雾,保持湿润即可,棚温很高时要开棚降温。扦插后2~3天内喷洒0.01%的多菌灵溶液,避免感染发病。插穗生根成活之后,及时检查,将没有生根成活的插穗拨出,再剪取新插穗进行补插,以充分利用苗地。生根1~2个月后逐渐拆除小拱棚。另外,幼苗的生长对于水分和养分的需求量较大,每隔5~7天喷一次低浓度营养液以确保苗木生长。
组织培养最大的优势是缩短育苗周期,母体较少的情况下能够在短时间内增加大量优质的母本种苗。
(1)外植体选择。
选当年生,健壮无病虫害,未完全木质化的茎段、茎尖或者叶为三尖杉组织培养外植体。
(2)培养基选择。
1)基本培养基。WPM为基本培养基,由大量元素50毫升/升,钙盐10毫升/升,微量元素、铁盐和肌醇各5毫升/升,甘氨酸、维生素B1、B5、B6各1毫升/升。
2)芽诱导培养基。WPM+IBA2.0毫克/升+6-BA3.0毫克/升+CM100毫克/升。
3)增殖培养基。WPM+6-BA3.0毫克/升+NAA0.3毫克/升或者WPM+6-BA2.0毫克/升+IBA0.3毫克/升。
4)生根培养基。1/2WPM+ABT15.0毫克/升。
5)上述培养基中均加6克/升琼脂粉和20~25克/升蔗糖,pH值5.6~5.8范围内,培养温度20~25℃,光照强度1500~2000勒克斯,每天光照12小时。
(3)培养方法。
剪取供试植物枝条上的茎段、茎尖或者叶片为外植体,剪成1.5~2.0厘米长,用流水冲洗干净后在洗衣粉稀释液中一一清洗并浸泡10~15分钟,浸泡完后取出再用流水冲洗1~2小时后转入提前准备的无菌水瓶中,置于超净工作台70%的酒精中消毒30秒,转入0.1%的升汞溶液中消毒8~10分钟,用无菌水冲洗3~5次后接入到基本培养基中。接种后的材料放进培养室培养,诱导幼枝增生。幼枝增生后,在超净工作台上将幼枝切成2~3节小的茎段,作为新的外植体进行继代培养。经过连续的继代培养扩大到一定数量以后,将幼枝切下,转移到生根培养基中诱导主根。生根苗经过与逐步炼苗后移栽。
(4)炼苗移栽。
当试管苗生根至2~3厘米时,选择健壮、长势整齐、根系生长良好的试管苗。首先将试管苗从培养室中取出,置于常温环境下,开始时先不开瓶炼苗,2天后将瓶盖开一小缝,3天后全部打开瓶盖,再过2天后将苗取出,用清水洗去根部培养基,用50%多菌灵可湿性粉剂800倍液浸泡15分钟左右,然后移栽到用0.1%高锰酸钾溶液或50%多菌灵可湿性粉剂500倍液消毒过基质中,基质为草炭土和珍珠岩(20:1)混合物。适量喷施500倍液多菌灵溶液,用薄膜覆盖搭建成小拱棚,小拱棚上方尽可能覆盖一层遮阳网,保持一定的温度和湿度,每隔7天喷洒一次500倍液代森锰锌或者多菌灵溶液,二者交替使用。1周后逐渐揭开薄膜,并逐渐增加光照。此时可叶面喷洒0.1%的磷酸二氢钾溶液,促进萌发新根及根系生长,尽量在傍晚喷施,每周喷施一次。一个月后试管苗生长健壮,根系发育完全,可移植到营养钵或苗床上。移栽成活率达80%以上。
(5)瓶外生根。
试管内生根时间较长且生根后需要炼苗,而生根苗的根系在培养基中,移栽较复杂,对根系破坏较大;另外,组培苗生产最严重的问题之一就是组培苗的污染问题,组培苗污染严重影响组培的生根过程。因此,组培苗瓶外生根技术的产生,给组培工厂化育苗带来技术性的革命。瓶外生根则可以利用已被污染的试管苗,在试管外进行灭菌后种植,定期对试管外生根苗喷施杀菌剂,也能使试管苗正常生根且成活,减少生产上的损失。
将培养瓶逐渐打开瓶盖,开始时轻松瓶盖,2天后将瓶盖开一小缝,3天后全部打开瓶盖,再过2天后将苗取出以备扦插。瓶外生根基质用草炭土和珍珠岩(20:1),即苗床中铺上混合均匀的两种基质。扦插前一天用0.5%高锰酸钾溶液喷淋灭菌消毒,也可以用500倍液代森锰锌或多菌灵溶液喷淋。将试管苗剪去基部愈伤组织,剪成3~5厘米的茎段,在浓度为1000毫克/升的生长素IBA中蘸2秒后插入苗床基质中。扦插株行距约为2厘米×2厘米,扦插深度为1.5厘米左右,苗床全部插齐后,全部喷洒500倍液代森锰锌或多菌灵溶液进行杀菌消毒,喷药量以保持土壤湿润即可,苗床基质湿度不宜过大。最后将小拱棚薄膜覆盖好,薄膜四周用砖头压紧。小拱棚上方覆盖一层遮阳网。温度一般控制在25~30℃,不能过高也不能太低。湿度保持在65%~90%。要注意起膜通风,喷水降温,防止温度过高。每隔7天喷洒1次500倍液代森锰锌或多菌灵溶液,二者交替使用。半个月左右后试管苗可以在苗床基质中开始生根。
(1)栽前准备。
1)地块选择。三尖杉育苗地宜选择在坡度较小、土层深厚肥沃、偏酸的沙性土壤、保水性好,并且较容易进行灌溉和具有遮阳设施的地块,排水不畅地块不宜栽培。土壤pH值5.5~6.5,地下水位>1米(丰水期)。
2)整地。首先人工将栽种地上的杂草、树枝、较大的石头及其他杂物全部清理干净,利用拖拉机式小型旋耕机或者有条件的可以使用大型旋耕机对土地进行旋耕整地,开沟起垄,一般旋地2~3次使土壤尽可能细匀。垄距50~100厘米,同时开出栽植沟,开沟的深度依据栽植苗木规格及其根系大小,一般沟深比苗木根长多5~10厘米即可。栽植穴规格60厘米×60厘米×40厘米,栽植株行距1米×1米或1.5米×1.5米,密度300~600株/亩。
3)苗木准备。必须是苗龄在两年生以上的苗木,高度在50厘米和地径为0.6厘米以上。杜绝病、弱苗及冻害(干梢)的合格苗。定植前苗木必须喷药进行病虫害处理,以提高栽种成活率。起苗移植时间在2~3月上旬为宜,此时苗木处于休眠期,树液刚刚开始流动,新枝芽尚未萌发,蒸腾量很低,移植成活率高。应边起苗边分级包装边装车。从装车到卸车须在4小时内完成。若因路途较远不能完成,需做好贮苗准备。运输过程中需加盖帆布,防风吹、日晒引发苗木失水。不能保证作业时间的情况下,应装车前苗木根部蘸泥浆,并尽可能包裹根部。另外,可将三尖杉移栽小苗主根切除1/2~1/3后再进行栽种,可提高苗木质量以及栽种成活率。
(2)苗木栽植。
1)栽植时间。在苗木芽膨大之前栽植,一般为初春。
2)栽植方法。移栽前,每个穴内施入磷肥0.5千克、复合肥0.25千克或者放入适量经腐熟发酵的牛马粪作基肥,基肥须与栽培土充分搅拌。移栽时苗木最好带土球,栽植时表土反到穴底,要求剪除过长的主根、不弯根,苗木要正立,培土以苗木地径部分加高5厘米。栽植方法按“三埋两踩一提苗”的原则栽植。栽种后还是要保持苗木的遮阴,可以按照栽种情况来搭建遮阳棚;或者间种一些遮阴植物给三尖杉提供一个遮阴的环境。
3)覆膜浇水。栽植后必须要浇透水(定根水),水下渗后上覆2~5厘米地表土,然后覆盖黑色地膜。栽种后3天后浇二水,再过5天浇三水,浇透水以保证成活率。此后浇水以保持土壤湿润为目的,切忌不可干到苗木。7~8月为降水丰沛期,可不浇水或少浇水,大雨后应及时将积水排出。
4)造林。抚育造林地宜选在地势较为平整山腰以下的山窝、谷地及阴面开阔地。土层深厚肥沃、排水良好且湿润、微酸或酸性的森林红黄壤为宜。必须是苗龄在两年生以上的苗木,高度在50厘米和地径为0.6厘米以上。杜绝病、弱苗及冻害(干梢)的合格苗。3月初前整完地,穴规格60厘米×60厘米×40厘米,每穴内均匀施入复合肥50克作底肥。移栽时苗木最好带土球,栽植时表土反到穴底,要求剪除过长的主根、不弯根,苗木要正立,培土以苗木地径部分加高5厘米。三尖杉造林密度一般为120株/亩,可与落叶乔木混交。株距2米,行距2.5米。造林后要连续管理3年,抚育5次便可成林,前两年分别在5~6月抚育一次,砍除有碍幼林生长的杂草和灌木,可将其覆盖在穴面上;9~10月锄抚一次,结合割抚,中耕培土。造林后3~5年,每年2~3月于树冠周围开沟,沟内均匀施复合肥每株0.25千克
(3)管理
1)水肥管理。栽种后5年内一定要保持土壤基质的湿润,由于春秋冬季的季节特性,自然降雨及地表水较低,因此保持每周浇水1~2次,雨季水量丰富要根据土壤湿度的情况来浇水或者不浇水,如果遇到大雨或暴雨天气,雨后要及时将田间积水排除。栽种年限越久,浇水次数可以适当减少到每月2~3次,有条件的可以对植株叶片进行喷雾来保持湿润。
每年田间锄草2~3次,时间分别是6月、8月和10月,锄后的草集中堆放集中处理;以定植苗为圆心直径长40厘米的地方挖松土,深度20厘米,将土块翻转过来并打碎土团,在40厘米处的沟内每株施复合肥0.25千克,在夏季适量施一些氮肥和喷洒赤霉素。栽种全过程中避免苗木直接暴晒于阳光下,由于三尖杉是喜背阴湿润的环境,全过程尽可能使用遮阳网有利于三尖杉更好的生长。
2)修剪。三尖杉植株前期生长较缓慢,但并不是不能进行修剪,首先修剪时间秋冬季,可适当修剪,此时树木处于休眠期,生长缓慢或不生长,主要以修剪徒长枝、枯枝、病虫枝,有利于保存养分和第二年的生长。
三尖杉病害主要是黄化病,通过叶面喷肥和液态肥灌根均可防治。出现黄化症状后,喷施0.2%硫酸亚铁或0.2%螯合铁防治效果很明显。喷施2次,中间间隔15天左右,也可用0.2%螯合铁灌根,肥效持续更长。通过加强栽培管理,合理施肥,该病害便可彻底防治。
三尖杉主要虫害有地老虎、蛴螬、红蜘蛛和蚜虫。地老虎和蛴螬主要为害植株根部,可用 50%辛硫磷乳油1000倍液灌根效果较好。红蜘蛛和蚜虫一般在3—9月发生,主要吸食植株嫩芽和叶片,使叶片卷曲、萎缩,严重影响幼苗生长;发生虫害时,选用3%啶虫脒乳油1500倍液、0.3%苦参碱水剂500倍液、1.8%阿维菌素乳油2500~3000倍液、43%联苯肼酯悬浮剂2000~3000倍液等轮换喷雾防治蜘蛛或蚜虫;应该根据虫害程度来适当增加或减少喷药次数。
(1)果实采收。
三尖杉果实表皮颜色呈现紫色或红紫色时果实成熟,时间为8~10月,海拔较高的地区时间可能到11月初。可人工采摘或者用竹竿敲打后收集备用。如果果实还没完全成熟可以堆放3~7天后即可。待果实成熟后把果肉及果皮搓去,用水将种子冲洗干净,去除杂质及瘪种,将水沥干后摊放在通风阴凉干燥处,注意要经常翻动,待其阴干,然后装在透气性好的麻袋、塑编袋中悬挂备用。
(2)枝叶采收。
三尖杉植株枝叶中含有的三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的含量最多,因此,应该采收植株枝叶部分,采收最佳时间在每年7月份,此时枝叶中有效成分相对含量较高。
(3)加工提取。
三尖杉的果实果肉部分含有较多的果胶和糖类以及大量水分,可用于鲜食、加工果酱、脯、果醋、果汁混合饮料、果酒、发酵酒等产品。将枝叶干燥粉碎,果实去果肉及内种皮,取果仁榨去油,残渣脱去残存油脂,挥发去溶剂,得果仁脱脂粉末,用90%~95%酒精回流提取,在经过氯仿梯度萃取后得到总生物碱。逆流分布法分离三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱,用薄层跟踪检查各分离器的上、下层溶液,便获得三尖杉酯碱或高三尖杉酯碱的单一成分的粗制品时分别收集,通过吸附柱层析精制后所得三尖杉酯碱(或高三尖杉酯碱)即为纯品。最后用薄层层析检测所分离样品是否与标准品一致即可。